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SW1990贴壁传代细胞株哪提供

更新时间:2017-09-12 信息编号:130057838
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1≥ 1件
  • 1.00 元

  • 其它

  • 塑料/塑胶

  • SW1990贴壁

详情介绍

联系方式
产品别名
SW1990贴壁
面向地区
延边
品牌
其它
材质
塑料/塑胶
适用范围
现代石油
型号
10ml
类型
其它

SW1990贴壁传代细胞株哪提供

SW1990贴壁传代细胞株哪提供 "

细胞接收后的操作流程与注意事项:
1、如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决
2、贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养
3、生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min)
2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4、注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)
1、收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时)
2、贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养
3、如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室" "

购买细胞注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min。
2.弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。" "

公司提供部分ATCC细胞有(限于页面篇幅,公司全部细胞并未展示,如有具体所需细胞,请咨询我们哦┈技┈术(订购)┈热┈线:0┈2┈1┈5┈4┈3┈8┈5┈3┈1┈3(1┈5┈8┈0┈0┈5┈7┈6┈8┈6┈7┈微┈信┈同┈号)┈联┈系┈Q┈Q:3┈3┈0┈6┈0┈8┈4┈3┈5┈0);CRL-2065|MLTC-1细胞;CRL-1442|BRL-3A细胞;CCL-61|CHO-K1细胞;CCL-81|Vero细胞;CRL-1651|COS-7细胞;CCL-34|MDCK细胞;CRL-1772|C2C12细胞;CRL-2300|RLE-6TN细胞;CCL-10|BHK-21细胞;CRL-1650|COS-1细胞;CRL-1570|NRK-49F细胞;CRL-6509|NRK细胞;CRL-1571|NRK-52E细胞;CCL-223|CMT93细胞;CCL-82.1|GH3细胞;CRL-1811|A9细胞;CCL-94|CRFK细胞;CRL-10762|CTLA4 Ig-24细胞;CCL-70|CV-1细胞;CCL-44|EBTr(NBL-4)细胞;CRL-1688|FRhK-4细胞;CRL-1600|H4-II-E-C3细胞;CRL-1446|H9c2(2-1)细胞;CCL-22|MDBK(NBL-1)细胞;CCL-64|Mv.1.Lu(NBL-7)细胞;CRL-2192|NR8383细胞;CRL-1840|OK细胞;TIB-18|P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]细胞;CRL-1580|P3X63Ag8.653细胞;CRL-1657|R1610细胞;CRL-1780|RF/6A细胞;CRL-2765|RSC96细胞;CCL-88|Tb 1 Lu细胞;HB-95|W6/32细胞;CRL-1751|WEHI 164细胞;CRL-1702|WEHI 231细胞;CRL-2057|RIN-m细胞;CRL-2947|RenCa细胞;CRL-1503|STO细胞;CCL-37|RK-13细胞;CCL-33|PK-15细胞;CRL-1711|SF-9细胞;CRL-1405|104C1细胞;TIB-67|J774A.1细胞;CRL-2872|EPC细胞;CRL-2181|SVEC4-10细胞;" "

常见问题及解决方案:
1、培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2、 细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以离心去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
3、对于生长缓慢的贴壁细胞:可采用适当的提高培养基中血清浓度,或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。
4、对于生长不均的贴壁细胞:在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长,而旁边则为一块空白),此时可将细胞进行消化,重新打散,贴壁,加入新培养基进行培养。
复苏细胞注意事项:
1收到细胞后当天换液,全部更换成客户自己的新鲜培养基,放进培养箱,第二天再消化。
2边观察边消化,根据细胞的形态,终止消化时间,采取以半分钟间隔吹打细胞边缘,如可吹打下来,即终止消化。客户摸索比较好的消化时间。
3随细胞有一份细胞操作说明书,请客户仔细查看。
4记得加1%双抗,降低被污染的概率。另外尽早冻存留种,以备后用。
5售后时间为一周,仅限于细胞本身的质量问题,而因乙方自己不当操作(不规范操作,消化过度,不加双抗导致的污染等)导致的细胞问题不在售后范畴。
6收到细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请您务必重视。
7刚收到细胞时,胎牛血清可以用15%培养两三天,利于细胞尽快恢复状态,细胞状态稳定后,再调回10%即可。
(其中1,2条针对于贴壁细胞,悬浮细胞详情请见细胞操作说明书)" "

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